出品公司:	ATCC
細胞名稱:	LS1034細胞, ATCC CRL-2158細胞, 人結腸癌細胞
細胞又名:	LS 1034; LS-1034
存儲人:	L Suardet
種屬來源:	人
組織來源:	結腸
疾病特征:	結腸癌
細胞形態(tài):	上皮細胞樣
生長特性:	貼壁生長
培養(yǎng)基:	DMEM培養(yǎng)基，90%；FBS，10%。
產品目錄號:	CRL-2158
生長條件:	氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%; 溫度：37  ℃,
傳代方法:	1：2至1：6，每周2次。
凍存條件:	90% 完全培養(yǎng)基+10% DMSO，液氮儲存
支原體檢測:	陰性
**等級:	1
STR:	Amelogenin: X,Y CSF1PO: 11,12 D13S317: 12 D16S539: 9,11 D5S818: 12,13 D7S820: 8,12 THO1: 7 TPOX: 9,11 vWA: 17
參考文獻:	Suardet L, et al. Responsiveness of three newly established human colorectal cancer cell lines to transforming growth factors beta 1 and beta 2. Cancer Res. 52: 3705-3712, 1992. PubMed: 1617643   Burmester JK, et al. Characterization of distinct functional domains of transforming growth factor beta. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90: 8628-8632, 1993. PubMed: 7690965   Li CY, et al. Potential role of WAF1/Cip1/p21 as a mediator of TGF-beta cytoinhibitory effect. J. Biol. Chem. 270: 4971-4974, 1995. PubMed: 7890601   Cottrell S, et al. Molecular analysis of APC mutations in familial adenomatous polyposis and sporadic colon carcinomas. Lancet 340: 626-630, 1992. PubMed: 1355210
細胞圖片：

LS1034細胞ATCC CRL-2158人結腸癌細胞接受后處理

1) 收到細胞后，請檢查是否漏液 ，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們。

 2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長 狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。

 3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加 6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。

 4) 如果細胞密度達80%-90%請及 時進行細胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng) 基。

 5) 接到細胞次日，請檢查細胞是 否污染，若發(fā)現污染或疑似污染，請及時與我們取得聯 系。
 

LS1034細胞ATCC CRL-2158人結腸癌細胞培養(yǎng)操作

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基 混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有 細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜） 。**天換液并 檢查細胞密度。

 2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。      
   
     1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

     2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作 臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。  
   
     3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

     4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

    1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細胞變圓 脫 落后， 加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數板計數。

    2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數量加 入血 清 和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液 ，注意凍 存管做好標識。

    3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記 錄凍存管位置以便下次拿取。

LS1034細胞ATCC CRL-2158人結腸癌細胞培養(yǎng)注意事項

 1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現 象發(fā)生 請及 時和我們聯系。
 
 2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所 需細胞 因子 等，確保細胞培養(yǎng)條件一致。若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現問 題，責任由客戶自行承擔 。

 3.   用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量 從瓶 壁脫落，將細胞置于培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng) 4~6 小時,再取出觀察。此時多數細胞均 會貼壁，若細胞 仍不能貼壁請用臺盼藍 染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常， 請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再 次貼壁培養(yǎng)；如果染色結果顯示細胞無活 力，請拍下 照片及時和我們聯系，信息確認后我們?yōu)槟倜?費寄送一次。

 4.   靜置細胞貼壁后，請將細胞瓶內的培養(yǎng)基倒出，留 6~8mL 維持細胞正常培養(yǎng)，待細 胞匯 合度  80%左右時正常傳代。

 5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內多余的培養(yǎng)基可收集備用，細胞 傳代時 可以 一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細胞逐漸適應培養(yǎng)條件。

 6.   建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和 Procell 技 術 部 溝通交流。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯 系，告知細胞 的具體情況，以便我們 的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

 7.該細胞僅供科研使用。