產品詳情
簡單介紹：
Sure
詳情介紹：
感受態(tài)細胞基本信息
| 出品公司: | Stratagene |
|---|---|
| 感受態(tài)細胞名稱: | Sure感受態(tài)細胞 |
| 菌株類型: | E.coli |
| 產品目錄號: | 200238 |
| 培養(yǎng)基: | LB培養(yǎng)基 |
| 生長條件: | 37 ℃, 有氧 |
| 基因型: |
 |
| 抗性: | 卡那，四環(huán)素 |
| 質粒轉化條件: | 42 ℃熱激 |
| 應用: | 克隆菌株 |
| 誘導方法: | -- |
| 菌株特點: |
SURE（Stop Unwanted Rearrangement Events）感受態(tài)細胞是設計用來克隆在傳統(tǒng)菌株中無法克隆的DNA片段序列的菌株。SURE感受態(tài)菌株缺乏催化重組和刪除非標準二級結構和三級結構， 例如十字形（由反向重復序列導致）和Z字形的DNA序列的組件。這些非標準二級結構和三級結構在真核細胞中經常出現(xiàn)，而且這些結構能夠阻礙真核細胞DNA 在傳統(tǒng)菌株中的克隆。sure感受態(tài)細胞是限制性內切酶陰性的(McrA-, McrCB-, McrF-, Mrr-, HsdR-)，核酸內切酶（endA）缺陷，和重組酶(recB recJ)缺陷的。同時sure感受態(tài)細胞中所具有的F´ 游離基因上面的lacIqZΔM15基因，使得能夠利用藍白斑進行克隆篩選。 SURE感受態(tài)細胞主要是用來克隆不穩(wěn)定DNA結構， 大腸桿菌DNA修復系統(tǒng)會針對重復序列、二級結構（如Z-DNA）等真核DNA進行重排或刪除修飾。SURE感受態(tài)細胞針對uvrC,umuC,SbcC 和RecJ等參與修飾的大腸桿菌基因或蛋白進行突變，提高了真核來源、不規(guī)則DNA的穩(wěn)定性達20倍以上，并且適合克隆甲基化DNA。 本身具有Kana和Tet抗性。當轉化氯霉素抗性質粒到sure感受態(tài)細胞中時，一定要用100 ug/ml的氯霉素平板去篩選。因為sure感受態(tài)細胞在40ug/ul的氯霉素條件下具有抗性，而對于100ug/ul的氯霉素抗生素具有敏感性。 sure感受態(tài)細胞可以用于藍白斑篩選，具有l(wèi)az互補基因。 在載體構建過程中，我們經常會遇到一些基因片段具有高度的重復，這導致插入載體中的序列可能會在細菌擴增中不穩(wěn)定，在質粒擴增中產生形成片段的缺失和重排，如發(fā)現(xiàn)插入片段高頻率地產生缺失和重排，可以嘗試使用重組缺陷大腸桿菌菌株，例如sure感受態(tài)細胞。 |